Este museo se encuentra en las tribunas del Santuario de la Patrona de Almonte. Sus salas y sus vitrinas sirven para conservar y exponer algunos de los elementos del patrimonio histórico-artístico de la Hermandad Matriz de Nuestra Señora del Rocío para entender los más de siete siglos de historia documentada de la devoción a la virgen.
Las piezas más antiguas expuestas son un panel de azulejería fechado en 1696, única pieza conservada del primitivo edificio religioso del siglo XIII; así como la conocida como Corona del Sol, la pieza de orfebrería del ajuar de la Blanca Paloma más antigua que posee, del siglo XVII.
Una selección de exvotos pictóricos, dos trajes completos, o la corona con la que la Virgen del Rocío fue coronada canónicamente el 8 de junio de 1919, son algunas de las piezas que ocupan las demás vitrinas, aparte del ajuar propio de los traslados (saya, esclavina, guardapolvo, sombreros y pañitos), documentos, o elementos de orfebrería, así como un paso procesional de la Reina de las Marismas, donado en 1933, terminan de llenar el espacio expositivo.
La visita culmina con la proyección de un resumen de la película Rocío. Reina y Madre de Andalucía, en un espacio íntimo desde el que se tiene una vista privilegiada del entorno natural de Doñana, que nos ayuda a entender uno de los vivas más pronunciados a la Virgen del Rocío, el de Reina de las Marismas.
En las mismas dependencias se encuentra la Oficina del Peregrino, que presta un servicio de atención a peregrinos, instituciones y hermandades, que quieren participar de la experiencia religiosa y cultural del Rocío, y es una herramienta de apoyo a todas las personas que buscan en El Rocío una experiencia religiosa, en viajes individuales y colectivos. Los trámites que se pueden realizar en la Oficina de Atención al Peregrino son: programar una peregrinación, misa, ofrenda floral u otro evento relacionado con el Santuario, solicitar la Indulgencía Plenaria, ventas de libros, dvds y credenciales del peregrino a Santiago entre otros.
